阅读: 2023/1/5 17:47:29
细胞培养过程中需要测定细胞的存活率以了解细胞的生长状态,鉴定细胞存活常用的方法有染色法和仪器分析法。
染色法可直接通过细胞形态,区别细胞死亡,它是一种简单的细胞存活鉴定方法。这里总结下死活细胞测定及细胞活力测定实验原理、实验步骤及注意事项。
第一步 实验原理
这里介绍下染色法,它是常用的细胞死活鉴定方法,简便,易于操作。实验是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异来进行的。
死活细胞在生理机能和性质上的差异主要体现在:
(1)死活细胞细胞膜通透性的差异:活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加。
(2)死活细胞在代谢上的差异:由于活细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,而死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们的无还原能力或还原能力极弱。
常见的细胞染料有:中性红(细胞器 的专有染料)、台盼蓝、甲基蓝、美蓝、荧光素双醋酸酯(FDA)等。
第二步 实验步骤
1. 试剂的配制
2. 染色操作步骤
3. 细胞活力测定
4. 按公式计算出细胞活力
转自:“丁香学术”微信公众号
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