一、染色原理

神经纤维比耳朔夫斯基（Bielschowsky）银染试剂是一种旨在使用银还原技术，分析固定处理的组织切片中神经原纤维、轴突、神经原纤维缠结和老年斑形态学的权威而经典的技术方法。

Bielschowsky银染主要适用于石蜡和冰冻脑组织或外周神经组织切片的相关纤维组织检测。神经纤维对于银离子敏感。通过嗜银染色，神经纤维还原离子银为可见金属银沉积，呈现黑色。

二、染色步骤

1.加入100微升显色液A（Reagent E）和100微升显色液B（Reagent F），混匀，标记为显色工作液；

2.加上200微升显色工作液在切片上，铺满整个切片样品表面；

3.室温下孵育10分钟，直至出现黑色为止（注意：显微镜下观察后继续下列操作）

4.即刻移去切片上的显色工作液；

5.即刻加上100微升终止液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面，室温下孵育1分钟，移去切片上的终止液（Reagent G）；

6.室温下，将切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分钟，移去切片上的 清理液（Reagent A）；

7.即刻加上100微升平衡液（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面，室温下孵育5分钟，移去切片上的 平衡液（Reagent H）；

8.室温下，将切片置入50毫升 清理液（Reagent A）中孵育2分钟，移去切片上的 清理液（Reagent A）；

9.加上100微升 补水液A（Reagent I）在切片上，铺满整个切片样品表面，移去切片上的 补水液A（Reagent I）；

10.100微升补水液B（Reagent J）在切片上，铺满整个切片样品表面，移去切片上的 补水液B（Reagent J）；

11.加上100微升净化液（Reagent K）在切片上，铺满整个切片样品表面，移去切片上的 净化液（Reagent K）；

12.放上盖玻片或封片（中性树脂）。

三、染色结果

神经原纤维、轴突、神经原纤维缠结和老年斑呈现金黑色，切片背景呈现黄色或棕色。

转自：“精英汇科研服务”微信公众号

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