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  • 【五分钟讲实验】如何做好天狼星红染色实验?

    阅读: 2023/9/15 14:29:10

    天狼星红染色(Siriusred):由于胶原呈碱性,与酸性染料起强烈反应。天狼星红就是一种很强的酸性染料,它可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。天狼星红染色胶原纤维呈红色,胞核呈绿色,余呈黄色。

    天狼猩红染色实验步骤

    1. 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

    2. 天狼猩红染色液染色:切片入饱和枯萎蒜天狼猩红染色液内染色8min。

    3. 漂洗:切片入无水酒精漂洗数分钟,显微镜下观察满意为止。

    4. 封片:切片于60°烤箱烤干后于二甲苯透明5min,中性树胶封片。

    5. 显微镜镜检,图像采集分析。

    6. 染色结果:光学显微镜下胶原纤维红色,背景黄色。

    天狼猩红染色实验注意事项

    1. 染液配制时,饱和枯萎蒜一定要过饱和,配制时要长时间搅拌后还有不溶的情况下才为饱和的。

    2. 饱和天狼猩红染液是一种两色混合染液,两种颜色同时都有作色能力,而且存在一定得制约平衡关系,所以染液在长期使用时随着带入的杂质过多,可能会影响这种平衡关系,所以建议染色结果不对时,应立即更换染液。

    3. 天狼猩红染色前,需要尽量将水甩干,避免多次染色后带入较多的水分使染液的染色能力下降。

    4. 染色后脱水时使用新的无水乙醇,并快速脱水,长时间脱水会影响染色结果。

    5. 如果需要染核,可以先染完天狼猩红后在用苏木素染核。

    转自:“晶莱生物”微信公众号

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