发表期刊：BMC Biology

论文标题：CLARITY提高了长期储存的人脑组织中荧光免疫染色的敏感性和特异性(CLARITY increases sensitivity and specificity of fluorescence immunostaining in long-term archived human brain tissue)

通讯作者：Michael Sch?n

第一作者：Sarah Woelfle

DOI：10.1186/s12915-023-01582-6

发表日期：2023年5月24日

背景

解剖后的人脑组织是研究细胞类型、连通性以及中枢神经系统分子结构的重要资源，在大量的脑部疾病研究方面更是如此。荧光染料进行免疫染色是一种重要的研究方式，这样可以同时对多个结构进行高分辨率的三维成像。尽管存在大量福尔马林固定的大脑样本，但研究往往有限，一些情况的出现使人脑组织在高分辨率荧光显微镜中的使用变得复杂。

结果

在这项研究中，我们为免疫荧光分析开发了一种灌注和浸泡固定的人脑组织透明化的方法，称为人透明脂质交换的丙烯酰胺杂交刚性成像/免疫染色/原位杂交兼容的组织水凝胶（hCLARITY）。hCLARITY通过减少脱靶标记来优化特异性，并在人脑切片中产生高敏的染色，从而实现超分辨率显微镜下对突触前和突触后区室进行前所未有的成像。此外，hCLARITY保留了阿尔茨海默病的标志，重要的是经典的 3,3'-二氨基联苯胺 (DAB) 或尼氏染色与该方法兼容。hCLARITY的用途非常广泛，使用30多种性能良好的抗体体现了这一点，同时其允许对同一组织切片进行去污和随后的重新染色，这对例如在超分辨率显微镜中的多重标记很重要。

结论

综上所述，hCLARITY能够以高灵敏度和低至亚衍射分辨率对人脑进行研究。因此，它在研究局部形态变化（例如神经退行性疾病）具有巨大的潜力。

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CLARITY increases sensitivity and specificity of fluorescence immunostaining in long-term archived human brain tissue

转自：“BMC科研永不止步”微信公众号

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