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【学界研圈】 2024/2/1 16:27:57

空间转录组实验你必须知道的那些事

[摘要]：技术原理10x Visium 空间转录组的技术工作原理是基于一种特殊化设计的载玻片完成样本捕获，从而空间位置标记的探针与细胞释放的 RNA 杂交，载玻片上原位完成反转录合成 cDNA，收集 cDNA，最后进行测序文库构建。一个载玻片可容纳4个切片(捕获区域)，...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:25:25

如何做好“蛋白表达”？

[摘要]：背景介绍：在蛋白表达系统的相关研究中，从头合成蛋白质并不是一个可行的选择。因此需要借助活细胞或细胞器用作生产和构建蛋白质的工厂。利用基因重组技术将特定基因的DNA序列作为模板生成蛋白质，被称为重组蛋白。其原理是将目的基因通过电转化或者热激等手段转入合适的宿主中...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:22:30

你想知道的蛋白提取纯化知识全在这了？

[摘要]：随着分子生物学、结构生物学、基因组学等研究的不断深入，人们意识到仅仅依靠基因组的序列分析来试图阐明生命活动的现象和本质是远远不够的。只有从蛋白质组学的角度对所有蛋白质的总和进行研究，才能更科学地掌握生命现象和活动规律，更完善地揭示生命的本质。由此许多学者将生命...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:21:40

PCR反应污染原因追踪及污染处理方法

[摘要]： PCR反应的特点是具有较大扩增能力与灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。1污染原因：1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:20:45

细胞长不好的原因与解答！

[摘要]：养细胞真是一件特别心累的事，不知不觉间可能就会出现很多问题，细胞不长了、不贴壁了......实在让人操碎了心。培养细胞不贴壁可能原因1.胰蛋白酶消化过度；2.支原体污染；3.培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；4.细胞老化；5.接种细胞起始浓度太低或太高。解...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:19:54

为什么qPCR 曲线每次都这么抽象、奇葩

[摘要]：大家在 qPCR 实验过程中，是否会经常遇到异常扩增曲线和熔解曲线的困扰，比如断裂的扩增曲线、复孔间重复性不好、熔解曲线杂峰.....甚至还有其他千奇百怪问题，令人头大～01 什么是扩增曲线和熔解曲线对于荧光定量 PCR 结果的判断，最直观就是看扩增曲线是否「...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:18:56

一文渗入了解蛋白SDS-PAGE电泳原理

[摘要]： 1SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶是一种网状结构，具有分子筛效应，可以根据蛋白质和核酸分子的电荷、形状和大小来分...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:18:21

细胞冻存与复苏的正确姿势！

[摘要]：细胞冻存与复苏，是细胞培养过程中的常见工作。细胞冻存，是指将细胞贮存在超低温环境中，使细胞暂时“冬眠”的技术，在需要的时候再进行复苏。细胞复苏，是把冻存在-80℃冰箱或液氮中的细胞快速解冻，并使细胞重新恢复生长的技术。本文将为大家介绍细胞冻存与复苏的技术要点和...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:17:28

支原体检测与清除攻略

[摘要]：在养细胞的过程中，总会有一些不速来客，它们总会不请自来，比如真菌、霉菌。但最令人头疼的还是支原体，它总是悄悄的来，对细胞造成极大的危害，今天就来认识一下支原体。1支原体是什么？支原体是目前为止发现的最小的原核生物，具有以下特点：1.形态结构与细菌相似，但又比细...

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【学界研圈】 2024/2/1 16:16:09

TUNEL法检测细胞凋亡原理和经验

[摘要]：细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧...

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