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【学界研圈】 2024/2/1 15:17:58

为什么要养成配mix习惯？

[摘要]：一定要混成Mix吗？不混不行吗？感觉有的时候一个一个加还快一点，那为什么还要混为Mix再加样呢?1. 便于吸出微量试剂：比如；有些酶类试剂，每管只加0.1微升，这个时候扩大体系就很重要2. 避免重复性步骤：在实验过程中，重复次数越多，就意味着失败的概率会增加，...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:17:24

师姐走心整理的细胞转染攻略

[摘要]：什么是细胞转染？细胞转染（Transfection）是指将外源性基因（如 DNA、RNA、蛋白质等）导入到细胞内的技术。转染的目的是产生重组蛋白，或特异性增强或抑制转染细胞中的基因表达。随着基因和蛋白功能的深入研究，转染已经成为科研实验中最常用的技术手段之一。...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:16:34

手把手教你流式样本制备

[摘要]：实验结果为何不尽人意，追本溯源后样本制备/处理是杀手！我们都知道流式样本制备作为流式细胞术至关重要的一环，对实验的成败有着举足轻重的作用。下面小编将流式细胞术中常见的样本制备方法给大家做一个小小的总结。让你完美制备实验样本，实验也能快人一步！！！图1.流式实验...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:14:58

看这里，你想不到的PCR问题总结

[摘要]： 1假阴性PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板：①模板中含有杂蛋白质。②模板中含有Taq酶抑制剂。③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白。④在提取...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:14:17

实验中培养基和玻璃器材灭菌方法解读

[摘要]：培养基是将微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的各种营养基质。培养基为微生物的生长提供营养物质和生存空间。灭菌的方法，通常可以分为四大类：1、加热灭菌：包括直接灼烧灭菌、干热灭菌、加压蒸汽灭菌、间歇灭菌和煮沸消毒；2、过滤去菌；3、射线灭菌和...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:12:35

【五分钟讲实验】如何优化ELISA实验？

[摘要]：酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种常用的基于抗原和抗体之间特异性键的分析免疫化学测定。ELISA实验优化过程中应测试许多因素，例如用于包衣的抗原或抗体的浓度、温度、各个步骤的持续时间、包被缓冲液的类型，例如磷酸盐缓冲盐水（PBS）或碳酸盐缓冲液）、样品制备方...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:11:52

RT-PCR完整攻略-原理介绍、引物设计、数据处理、绘图

[摘要]： 1原理介绍定量逆转录PCR（quantitative reverse transcription PCR, RT-qPCR）是应用于以RNA作为起始材料的PCR实验中的一种实验方法。在该方法中，总RNA或信使RNA（mRNA）首先通过逆转录酶转录成互补DNA（...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:10:43

细胞裂解液配方和选择

[摘要]：细胞裂解液的目的：（1）利用去垢剂破坏脂质双分子层，破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性。常见的细胞裂解液成分： 50mM Tris-HCl pH7.4 （缓冲体系） 150mM NaCl （...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:08:05

大肠杆菌化学转化原理和问题解决

[摘要]： 1DNA要进入细胞需要克服的困难困难1：DNA带负电荷，细菌的细胞膜也带负电荷，需要克服DNA和细胞膜间的电荷排斥作用；困难2：DNA进入细胞需要细胞膜上有孔隙。图1.DNA和细菌细胞膜的电荷排斥克服电荷排斥化学感受态细胞转化的第一步，加入DNA后，轻弹管壁混...

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【学界研圈】 2024/2/1 15:06:35

电子分析天平可以准确称量毫克级样品吗？

[摘要]： 01电子分析天平可以称量毫克级样品吗？如果询问100个同学，相信有99个同学都会回答：当然可以呀！我们一直都是这样使用的，也没有任何问题。还有同学可能会回答：因为这台电子分析天平的可读性0.1mg，当然可以称量毫克级样品，有啥问题呢？然而，专业的称量专家在回答...

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