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学界研圈
】
2024/2/1 15:47:26
常用蛋白标签特点(二)
[摘要]: 蛋白标签是利用DNA体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。常用的蛋白标签包括谷胱甘肽S-转移酶 (GST)、麦芽糖结合蛋白(MBP)、硫氧还蛋白(Trx)、链霉亲和素(SA)、多聚组氨酸(Poly-H...
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【
学界研圈
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2024/2/1 15:46:30
干货丨实验室质量控制常用的10大方法
[摘要]: 实验室质量控制如何做?一起来看这些方法!标准物质监控1.1 质控过程通常的做法是实验室直接用合适的有证标准物质或内部标准样品作为监控样品,定期或不定期将监控样品以比对样或密码样的形式,与样品检测以相同的流程和方法同时进行,检测室完成后上报检测结果给相关质量控制...
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【
学界研圈
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2024/2/1 15:45:54
酵母双杂交原理和载体的选择
[摘要]: 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid)以酵母遗传分析为基础,研究反式作用因子之间相互作用对真核基因转录调控影响的实验系统。其最有价值的应用是用BD-X筛选由AD-Y构成的cDNA文库,以获得新的蛋白质之间的相互作用,并分析研究新的基因。 酵母双杂交...
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【
学界研圈
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2024/2/1 15:45:21
实验室超纯水存放的要求
[摘要]: 1、即取即用:超纯水取水后很容易遭到环境污染,所以使用前取水(即取即用)方式时最合适的。只有把超纯水与环境接触的时间缩到极短,才能够获得纯度极高的超纯水。2、存放时间:在配置高纯度的化学试剂时,尽量不要使用长时间储桶中存放的超纯水,因为储桶经长时间使用后,会因...
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【
学界研圈
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2024/2/1 15:44:39
实验技巧 | 一文理清免疫荧光实验流程和常见问题
[摘要]: 免疫荧光(immunofluorescence)是一种常用的光学显微术,即用荧光显微镜来观察细胞中的特定生物分子。免疫荧光依赖于抗体抗原的特异性结合,然后通过直接标记或间接标记方法使用荧光分子指征抗体-抗原结合的位置,以确定目标生物分子在细胞中的位置、丰度和分...
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【
学界研圈
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2024/2/1 15:43:24
细胞接毒操作步骤及注意事项
[摘要]: 1操作步骤1.准备细胞:选择适当的细胞系,培养并使其达到适当的生长状态。2.准备病毒:根据你需要的病毒和浓度,制备好病毒溶液,如腺病毒、逆转录病毒等。3.接毒:当细胞长到合适密度时,就可以进行接种(建议在细胞传代48h内进行接种,细胞密度达80-90%左右进行...
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学界研圈
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2024/2/1 15:42:47
如何选择流式抗体?
[摘要]: 由于在流式细胞实验过程中,荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此,需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素,例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。1必须满足抗体选择的基本条件流式抗体本身也是抗体,所以选择流式抗体一...
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学界研圈
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2024/2/1 15:41:52
WB条带出现各种状况? 原因分析和解决方法在这里!
[摘要]: Western Blot虽是实验室最常用的蛋白分析技术,但是由于它步骤繁琐、操作流程长、影响因素多,所以,导致我们在做实验时会遇到各式各样的问题。今天我们总结了一些WB实验中经常遇到的各种“奇葩”条带问题,并为你推荐了常用的解决方法,希望对大家有所帮助。一、目...
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学界研圈
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2024/2/1 15:34:53
流式细胞术技巧攻略!
[摘要]: 文献中我们经常能看见这种图,也就是流式结果分析图,美观、简单、一目了然。流式细胞术(flow cytometry)是20世纪60年代后期开始发展起来的利用流式细胞仪快速定量分析细胞群的物理化学特征以及根据这些物理化学特征精确分选细胞的新技术,主要分为流式分析和...
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学界研圈
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2024/2/1 15:34:02
【实验分享】轻松掌握细胞克隆方法
[摘要]: 实验原理细胞克隆形成实验是用来检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性等项目的重要技术方法。当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。其中细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不...
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