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学界研圈
】
2024/2/1 15:03:22
一文看懂-如何选择重组蛋白表达系统
[摘要]: 得益于生物资源和相关基因序列数据如今能够随时便捷获取,加上蛋白质生产系统的进步,许多实验室开始自行生产用作生物试剂的蛋白质。这使研究人员能够控制实验中使用的蛋白质的成本、可用性和质量。然而,许多在各自实验室负责生产重组蛋白的研究人员对现有的基因表达系统几乎没有...
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【
学界研圈
】
2024/2/1 14:58:23
WB-蛋白Marker那些事
[摘要]: 1蛋白Marker的作用要了解蛋白Marker的作用,首先需要了解SDS-PAGE电泳分离蛋白的原理,在电泳中,分子量越小的蛋白遇到的阻力更小,移动得越快,跑到凝胶前沿;分子量越大的蛋白遇到的阻力更大,移动得更慢,留在凝胶的上端(注意这和分子筛层析原理不同)。...
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【
学界研圈
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2024/2/1 14:56:31
Western blot 中Tween-20作用是什么?
[摘要]: Western blot的洗液TBST是实验室常用的配制液体,对于TBST的配方也基本上相差不多,其中配方中就有一种组分是Tween-20,一种黄色或琥珀色澄明的油状液体,具有特殊的臭气和微弱苦味。用移液枪吸取时会有一种滞后感。为什么在Western blot...
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【
学界研圈
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2024/2/1 14:54:48
RNA质量好不好决定下一步实验成败
[摘要]: 导读合格的RNA样本是进行很多实验的前提,RNA质检有很多种方法,相对来说,琼脂糖凝胶电泳是一种非常好的RNA质检方法,既能检测RNA的完整性和浓度,还能判断RNA样本中是否有蛋白和gDNA的污染情况,而且不需要依赖特殊昂贵的仪器设备。但是RNA电泳虽然简单,...
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学界研圈
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2024/2/1 14:52:10
实例讲解特殊蛋白WB实验技巧
[摘要]: Western blotting(免疫印迹分析)是一种常用的蛋白质检测技术,用于检测样品中特定蛋白质的存在和定量。WB作为一个最为基础的生命科学检测方法之一,经过长时间摸索与分析,目前已经有了一系列适配性较高的通用WB实验检测方案和流程。但是蛋白质作为一个特异...
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学界研圈
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2024/2/1 14:51:28
一抗怎么选?
[摘要]: 为了缩小选择范围,实验中通常要考虑以下几个方面:1. 分析或者应用类型2. 样品的性质3. 样品的物种4. 一抗的宿主物种5. 抗体的标记和检测1应用识别相同蛋白的不同抗体,由于识别位点不同,决定了不同的使用用途。例如,许多抗体识别位点位于折叠蛋白的内部,因此...
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学界研圈
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2024/2/1 14:50:44
生物安全柜操作规范的20条军规!
[摘要]: 作为生物安全实验室的一级屏障,生物安全柜是科研或医疗实验室中重要的硬件装备,为了让实验室人员规范使用生物安全柜,现归纳出以下注意事项,希望大家在实际操作中尽可能规避风险。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者...
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学界研圈
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2024/2/1 14:50:03
生物学实验常用抗生素的选择和配方
[摘要]: 1抗生素原理现代实验室研究的细胞多以原核细胞、真核细胞为主,为了独立研究某类细胞,需要抑制其他类型细胞的增殖,例如养293T时加青霉素/链霉素,抑制潜在的原核细菌增殖,但又不影响293T的功能。那抗生素是什么机制呢?这个首先了解一个细菌或者细胞想要存活,需要以...
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学界研圈
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2024/2/1 14:49:14
基因表达调控看完这篇就懂了
[摘要]: 在基因功能研究中常用两种基础策略,功能减弱或缺失,功能增强或获得。实现基因功能减弱,可以采用RNA干扰(RNAi)技术下调目的基因表达。在RNAi使用中,siRNA或shRNA的设计是关键。长度约为21bp的siRNA与蛋白形成RISC复合物,结合目的基因的m...
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学界研圈
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2024/2/1 14:48:16
一文看透普通PCR七大要素
[摘要]: PCRPCR是一种能够在短时间内将单个DNA分子扩增数百万倍的生化过程。其扩增过程包括三个连续步骤:(1) 变性,对双链DNA模板进行加热,使其解离;(2) 退火,被称为引物的短DNA分子与目标DNA的侧翼区域结合;(3) 延伸,DNA聚合酶沿着模板链将引物3...
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